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                  學(xué)術(shù)專(zhuān)欄
                  生化分析儀雙試劑R1、R2消耗量不對等的解決辦法

                  在生化室日常工作中,大家會(huì )發(fā)現:在雙試劑測試項目中,總是R2用完了,而R1尚余很多,隨著(zhù)檢驗次數的累積,這種效應越加明顯,留下來(lái)的R1留之無(wú)用,棄之可惜。


                  生化試劑R1、R2消耗量不對等的原因:


                  如果查閱儀器說(shuō)明書(shū),可以發(fā)現生化試劑在使用過(guò)程中是有損耗的,這種效應是由于儀器本身設計有試劑 ”取樣/ 富余量“所致,多數儀器都存在這種問(wèn)題。

                  儀器在試劑瓶轉移到反應杯的過(guò)程中,會(huì )多吸入大概5ul的量,R1、R2同樣的加試劑辦法,到最后會(huì )出現什么情況呢?以ALT試劑為例,規格R1為200ml,R2為50ml,正常情況下儀器參數設為:樣品20ul; R1為160ul,R2為40ul,實(shí)際吸試劑時(shí),R2每次吸的量是45ul,這樣R2將在1111次測試后用完,而R1在1111*(160+5)次測試后,用量為183ml,富余量為17ml,相同批號試劑累積到5盒時(shí),R1的富余量將是85ml。


                  解決思路:


                  在雙試劑測試中,R1 一般為緩沖液, R2為反應物質(zhì)混合物。設想: 兩試劑按二種不同比例混合,其所含反應物成分、構成比不變,只是反應物濃度不同,而反應物濃度不同對測定中的反應實(shí)質(zhì)沒(méi)有影響,只對反應的有效檢測線(xiàn)性范圍有影響;在樣品量不變的情況下,如果適當增加反應物濃度,其線(xiàn)性范圍變寬,濃度減低, 則線(xiàn)性范圍變窄;而如果同時(shí)將樣品量也減少一些,則僅是曲線(xiàn)的斜率略降低(靈敏度略降低),而線(xiàn)性范圍幾乎不受影響;對于酶類(lèi)速率法測定來(lái)說(shuō),在沒(méi)有校準品時(shí), 所提供的K 值有意義,不能輕易改動(dòng),而在有校準品時(shí),K 值是可以調整的。


                  解決辦法:


                  如果處于節約試劑的考慮,如上例ALT項目可采?。篟1 設定量不變,R2 新設定量為為36ul。樣品新設定量= 原設定量(20ul) *(36/40) = 18ul,用校準品重新定標。


                  結果:


                  R2采用新設定量36ul,總的測試數變?yōu)?219次,比原先1111次增加了119次,增加了10%的測試數,即實(shí)現了節省試劑成本10%;理論上,犧牲了很小的檢測靈敏度,實(shí)際應用中,室間質(zhì)評和室內質(zhì)控都沒(méi)有影響。


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